Comptage et développement
Nous avons collaboré avec un chercheur (à la retraite) de laboratoire : M. Kaas. Il nous a expliqué le principe de la culture en Batch et comment suivre la croissance. Il nous a apporté trois souches d'algues : la Tisochrysis, la Skeletonema et la Dunaliella.
A l'aide d'un spectrophotomètre (fabriqué maison avec une carte Arduino), nous avons mesuré la tension d'une résistance en sortie du montage (voir schéma). Cette tension est proportionnelle à l'absorbance : les algues absorbent la lumière qui passe dans la cuve, plus il y en a d'algues, moins il y a de lumière à passer.
Grâce à cela nous pouvons calculer l'absorbance :
Absorbance = 100 - A/A0 *100
avec A = mesure de l'échantillon,
A0 mesure du blanc (cuve avec eau de mer sans algues),
A/A0 donne la transmission,
et 1-A/A0 donne par conséquent l'absorbance.
On multiplie par 100 pour avoir le pourcentage.
Il existe une autre solution pour mesurer la densité d'algues dans la culture : le comptage cellulaire.
Grâce à une cellule de Malassez (un quadrillage microscopique), nous pouvons compter le nombre d'algues dans un microlitre.
Le comptage cellulaire prend beaucoup de temps c'est pourquoi nous devons établir un lien entre les deux mesures :
Pour cela nous faisons des dilutions qui serviront à établir un rapport entre les deux mesures.
voici les résultats :
absorbance/dilutions
absorbance/comptage
Pour calculer ce rapport il faut d'abord calculer la pente du graphique et son ordonnée à l'origine grâce à des formules dans le tableur.
Puis il suffit de multiplier l'absorbance par la pente et d'additionner l'ordonnée à l'origine pour trouver la densité de cellules par microlitres :
comparez les résultats à "Test(calculs)/cellule(observations)" ci-dessus .